受激辐射损耗显微镜 (Stimulated Emission Depletion Microscope, STED) 是一种突破光学衍射极限的显微镜技术。采用两束激光同时照射样品，其中一束激光用来激发荧光分子，使物镜焦点艾里斑范围内的荧光分子处于激发态；另外一束中心光强为零的环形损耗激光与之叠加，使物镜焦点艾里斑边沿区域处于激发态的荧光分子通过受激辐射损耗过程返回基态而不自发辐射荧光，因此只有中心区域的荧光分子可自发辐射荧光，从而获得超衍射极限的荧光发光点。STED技术是唯一不需要通过算法的超分辨技术，给研究者采集最真实的实验数据。

　　STEDYCON是Abberior公司的一款全新设计、极其易用的超高分辨率显微镜，可同时提供 4通道共聚焦/3通道 STED 超分辨多色荧光成像，纯光学解析，无需长时间大量图像函数计算，方便任何使用者快速实现超高分辨率图像的采集，2D-STED最高分辨率可达40 nm（40～200 nm可调）。

　　STEDYCON采用全脉冲式设计，包括488/561/640 nm共聚焦激发激光（405 nm为连续激光），775 nm STED 压制激光，单光子计数级APD （雪崩二极管）门控检测器，有助于获得高动态范围、背景干净、荧光信号强的高质量共聚焦图像，又可避免荧光漂白，减少样本伤害。同时，具备EasySTED极稳定光路设计，任何扫描视野都保持理想激发和同心圆受激辐射损耗光斑，无需严苛的实验室环境控制和反复校准即可实现STED成像。 

　　STEDYCON主要用于固定/活细胞或组织内部超微结构和形态变化（如各种细胞的亚细胞器、分泌囊泡、细胞骨架、突触、染色体以及蛋白质等）的超高分辨率图像采集；研究亚细胞水平上细胞生物物质定量、定时和定位分布检测等。支持四色共聚焦和红光/远红光范围的荧光超分辨图像同步展示，其应用方向包括：点扫描共聚焦所涵盖的日常需求；活细胞亚细胞结构的观察；固定细胞/组织切片的亚细胞结构观察；固定细胞的共定位观察。 

　　应用范围

　　常见检测指标：XY分辨率≤ 40 nm（与染料和物镜有关），3通道STED成像 / 4通道共聚焦成像，可以将共聚焦图像和超分辨STED图像同位展示，可以在超分辨成像下维持长时间焦平面稳定。 

　　1．核孔复合物的八聚体，每个点的距离是50 nm，可清楚地呈现出来。

  图1 核孔复合物

　　2． 可以将共聚焦图像和超分辨STED图像同位展示

图2 Tubulin & Clathrin的共聚焦和超高分辨同位展示

　　3．可以在超分辨成像下维持长时间焦平面稳定

图3 长时程拍摄不离焦