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微流控细胞实时分析系统品牌为美国默克,型号CellASIC ONIX II,由CellASIC® ONIX II微流控系统和EVOS FL auto2自动荧光显微镜组合而成。前者用于活体细胞长时间培养,后者用于监控和自动拍摄图像或视频。微流控系统由组合泵、微流体主控装置和专用培养板组成。组合泵向微流控主控装置输送CO2气体和各种操纵气流,并监控培养腔内部的环境条件。专用的CellASIC® ONIX Microfluidic Plates细胞培养板提供培养腔并储存细胞培养所需,准备注入的灌洗液和各种药物等。
图1 全系统示意图,左起为微流控主机、微流控培养板、倒置显微镜及微流控主控计算机
倒置显微镜系统结合微流控芯片的灌流系统与精确的动态控制系统,模拟细胞在生物体内的新陈代谢环境和条件;通过灌流管路运送培养基中的营养成分,并通过管壁上的间隙扩散到细胞生长区,摆脱培养箱的限制,实现细胞动态实时成像功能,以及显微镜下细胞长期持续观察。
其技术特点包括:
1.不依赖培养箱的长期细胞体外培养:通过外置仪器控制液流、温度和气体,不需要培养箱即可完成持续体外细胞培养过程。
2.动态精确调控:计算机软件与控制仪器完美结合,准确控制细胞生长条件和每个实验步骤,并可根据实验随时调节,利用同一个样本可获得多项数据,使实验设计和操作更加灵活。
3.实时动态观察:整个实验过程都可以在显微镜下监测完成,实现了传统培养方法无法实现的实验设计,如长期形态学观察和动态实验如细胞迁移,药物运输与释放等。通过连续图像或视频的获取,反应真实完整的实验数据。
应用范围
1.长时间不同条件下细胞及细菌培养成像
bacteria growth cell collection
2.细胞免疫染色
3.动态观察3D细胞培养
MCF10A-3D culture
4.极端环境(低氧/养)下细胞损伤与修复
5.细菌或者酵母单细胞反应,藻类应激反应
Yeast arrest-releas Yeast japonicus-growth
6.细胞自噬、细胞周期研究
LC3-GFP-p62
7.细胞迁移
Neutrophil Migration
8.GFP/YFP/CFP表达
GFP-actin cytochalasin